在近些年里,柱效和使用超高效色譜柱(被稱(chēng)為“UHPLC”色譜柱)作為實(shí)現(xiàn)分離目標(biāo)的手段已得到了很大的重視。UHPLC已通過(guò)更快速的分離和更快速的方法開(kāi)發(fā)提高實(shí)驗(yàn)室生產(chǎn)力來(lái)證明了其價(jià)值。
UHPLC色譜柱的維護(hù):
1、使用保護(hù)柱
2、大多數(shù)柱的PH穩(wěn)定范圍是2-7.5,盡可能在此范圍內(nèi)使用
3、避免流動(dòng)相組成及極性有劇烈變化
4、流動(dòng)相使用前必須經(jīng)脫氣和過(guò)濾處理
5、如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動(dòng)相,要在實(shí)驗(yàn)完畢將柱子沖洗干凈
6、壓力升高時(shí)更換保護(hù)柱
在使用緩沖液的過(guò)程中還要注意以下幾點(diǎn):
a.避免使用鹽酸鹽,鹽酸鹽對(duì)鋼質(zhì)有腐蝕作用;
b.緩沖液要現(xiàn)配現(xiàn)用,往往緩沖液是良好的菌類(lèi)培養(yǎng)液,隔天或放置長(zhǎng)時(shí)間實(shí)驗(yàn)時(shí)會(huì)發(fā)生很多怪現(xiàn)象;
c.使用緩沖液要及時(shí)掌握pH范圍,做到胸中有數(shù);
d.清洗液路和柱子時(shí),有溫控可加熱到30攝氏度易于沖洗;
e.長(zhǎng)時(shí)間用緩沖溶液要注意觀(guān)察接頭處有無(wú)析出,若有白色鹽類(lèi)析出,定期用10%硝酸沖洗液路可以避免液路的堵塞;
f.選擇緩沖液要用可靠的試劑,避免不純的鹽類(lèi)造成不必要的麻煩;過(guò)渡流動(dòng)相是指有機(jī)相和水相的組成與分析流動(dòng)相相同,但是不含緩沖鹽的溶液。